Éta maénkeun peran penting dina prosés kahirupan, fosforilasi Tyrr, Ser, Thr, ayana dina péptida.Asam amino phosphorylated ilaharna dipaké dina produksi péptida asam fosfat, ayeuna dipaké dina asam amino phenyl phosphorylated tunggal.HBTU / asam amino phosphorylated ilaharna dipaké pikeun nyambungkeun asam amino phosphorylated HOBt / métode DIEA, tapi asam fosfat péptida nu milih defects pendekatan ieu, utamana dina dihasilkeun leuwih lila péptida péptida atawa asam amino fosfat, nyambungkeun efisiensi low, low. purity tina produk ahir.Pikeun fosfopéptida ieu, urang nganggap pendekatan pasca-fosforilasi selektif.Prosés generasi nyaéta ngaleupaskeun selektif gugus pelindung ranté samping asam amino anu kedah dilabélan saatos sintésis péptida.Pikeun Tyr, Thr bisa langsung ngaréaksikeun maké asam amino kalawan ranté samping nu teu dijagi.-Ser (trt), quantitatively dihapus dina 1% TFA / lingkungan DCM.
Fosforilasi, kalawan ganda bénzéna phosphite phosphoramide jeung opat nitrogén dihasilkeun sarta phosphoramide tetrazolium panengah aktif, disambungkeun ka hidroksi, lajeng dina asam péroxida oksidasi formasi fosforil, réaksi lengkep.
Ayeuna, metode modifikasi péptida fosforilasi aya dua jinis utama:
(1) bubuka langsung asam amino phosphorylated dijamin moderately kana runtuyan polipéptida;
(2) sanggeus résin dihasilkeun dina runtuyan péptida, mun Ser, Tyr, atawa Thr fosforilasi ranté samping hidroksil.
1) bakal ngajamin sedeng asam amino fosforilasi langsung ngenalkeun sekuen péptida:
Nyaéta, asam amino anu kedah difosforilasi bakal difosforilasi sareng ditangtayungan sateuacanna nganggo (Thr,Ser atanapi Tyr), teras fosforilasi bakal disempitkeun ka titik pamilihan indéks polipéptida dumasar kana prosés generasi SPPS normal. .Metoda ieu gampang dioperasikeun, geus jadi métode utama modifikasi fosforilasi perusahaan péptida.
2) sanggeus résin dihasilkeun dina runtuyan péptida, mun Ser hidroksi fosforilasi, Tyr, atawa ranté samping Thr:
Fosforilasi hiasan ngagunakeun fosforilasi tina kontraksi tunggal kana metoda polipéptida, alatan halangan steric dihasilkeun ku grup badag dina hiasan ranté samping, hese pikeun fosforilasi asam amino pikeun ngaleutikan jeung ranté péptida.Dina mangsa nu bakal datang, bubuka asam amino bakal leuwih hese, utamana dina hiasan nu ngandung sababaraha situs fosforilasi, generasi bakal jadi pisan hésé, komposisi produk ahir kompléks, hésé misahkeun, sarta ngahasilkeun pisan low.
Ku alatan éta, nalika sababaraha situs dina ranté péptida difosforilasi, hiji bisa milih pikeun ngahasilkeun runtuyan péptida dina résin lajeng fosforilasi ku gugus hidroksil ranté samping Ser, Tyr, atawa Thr: generasi na utamana ngalibatkeun panyabutan selektif tina. gugus pelindung ranté samping anu merlukeun pangakuan asam amino sanggeus sintésis péptida.Pikeun Tyr, Thr bisa langsung ngagunakeun ranté samping asam amino teu ditangtayungan di respon.
Sisi ranté panyalindungan base 1% TFA / lingkungan DCM quantitatively bisa dihapus.Lamun metoda ieu dipilih, hiji phosphoramidite tetrazolium aktif panengah bisa dihasilkeun maké dibenzyl phosphoramidite jeung tetrazolium, numbu ka gugus hidroksil, lajeng dioksidasi pikeun ngabentuk gugus fosforil dina lingkungan peroxyacid pikeun ngalengkepan réaksina.
waktos pos: Sep-08-2023