Salaku alat-precision tinggi, HPLC bisa kalayan gampang ngakibatkeun sababaraha masalah leutik troublesome lamun teu dioperasikeun dina cara nu bener salila pamakéan.Salah sahiji masalah anu paling umum nyaéta masalah komprési kolom.Kumaha gancang troubleshoot hiji kromatografi faulty.Sistem HPLC utamana diwangun ku botol reservoir, pompa, injector, kolom, kamar hawa kolom, detektor jeung sistem ngolah data.Pikeun sakabéh sistem, pilar, pompa sareng detéktor mangrupikeun komponén konci sareng lokasi utama anu rawan masalah.
Konci pikeun tekanan kolom nyaéta daérah anu kedah diperhatoskeun nalika nganggo HPLC.Stabilitas tekanan kolom raket patalina sareng bentuk puncak kromatografi, efisiensi kolom, efisiensi pamisahan sareng waktos ingetan.Stabilitas tekanan kolom henteu hartosna yén nilai tekanan stabil dina nilai anu stabil, tapi kisaran fluktuasi tekanan antara 345kPa atanapi 50PSI (ngamungkinkeun ngagunakeun élusi gradién nalika tekanan kolom stabil sareng laun-laun robih).Tekanan tinggi teuing atanapi rendah teuing mangrupikeun masalah tekanan kolom.
Anu paling rawan gagal sareng solusi HPLC
1, tekanan tinggi nyaéta masalah paling umum dina pamakéan HPLC.Ieu ngandung harti naékna dadakan dina tekanan.Sacara umum, aya alesan di handap ieu: (1) Sacara umum, ieu alatan sumbatan saluran aliran.Dina titik ieu, urang kudu nalungtik eta piecewise.a.Kahiji, motong kaluar inlet tina pompa vakum.Dina titik ieu, tube ngintip ieu ngeusi cairan jadi tube ngintip éta leuwih leutik batan botol pangleyur pikeun nempo lamun cairan ieu dripping di will.Lamun cairanana teu dripping atawa dripping lalaunan, sirah filter pangleyur diblokir.Perawatan: Soak dina asam nitrat 30% salami satengah jam sareng bilas ku cai ultrapure.Lamun cairan drips acak, sirah filter pangleyur normal jeung keur dipariksa;b.Buka klep Purge supados fase sélulér henteu nembus kolom, sareng upami tekanan henteu ngirangan sacara signifikan, saringan sirah bodas diblokir.Perlakuan: Whiteheads disaring dihapus sarta sonicated kalawan 10% isopropanol keur satengah jam.Anggap tekanan turun handap 100PSI, sirah bodas disaring normal tur keur dipariksa;c.Leupaskeun tungtung kaluar tina kolom, upami tekanan henteu turun, kolom diblokir.Perawatan: Upami éta sumbatan uyah panyangga, bilas 95% dugi tekananna normal.Upami halangan disababkeun ku sababaraha bahan anu langkung dijaga, aliran anu langkung kuat tibatan fase gerak ayeuna kedah dianggo pikeun ngagancangkeun tekanan normal.Upami tekanan beberesih jangka panjang henteu turun dumasar kana metodeu di luhur, inlet sareng outlet kolom tiasa dianggap nyambung ka alat sabalikna, sareng kolom tiasa dibersihkeun ku fase mobile.Dina waktu ieu, lamun tekanan kolom masih teu ngurangan, piring tabung lawang kolom ngan bisa diganti, tapi sakali operasi teu alus, éta gampang pikeun ngakibatkeun ngurangan éfék kolom, jadi coba ngagunakeun kirang.Pikeun masalah hese, ngagantian kolom bisa dianggap.
(2) Setélan laju aliran anu salah: Laju aliran anu leres tiasa direset.
(3) Rasio aliran lepat: indéks viskositas tina proporsi béda aliran béda, sarta tekanan sistem pakait tina aliran kalawan viskositas luhur ogé leuwih badag.Mun mungkin, pangleyur viskositas handap bisa diganti atawa diatur ulang tur disiapkeun.
(4) tekanan Sistim enol drift: ngaluyukeun enol tina sensor tingkat cair.
2, tekanan teuing low (1) biasana disababkeun ku leakage sistem.Naon anu kudu dipigawé: Panggihan unggal sambungan, utamana panganteur dina duanana tungtung kolom, sarta tighten wewengkon bocor.Cabut pos jeung tighten atawa garis film PTFE kalawan gaya luyu.
(2) Gas asup kana pompa, tapi tekanan biasana teu stabil dina waktos ieu, luhur sareng rendah.Langkung serius, pompa moal tiasa nyerep cairan.Metoda perlakuan: buka klep beberesih tur bersih dina laju aliran 3 ~ 5ml / mnt.Upami henteu, gelembung hawa disedot dina klep knalpot nganggo tabung jarum khusus.
(3) Taya outflow fase mobile: pariksa naha aya fase mobile dina botol embung, naha tilelep ieu immersed dina fase mobile, sarta naha pompa geus ngajalankeun.
(4) Klep rujukan henteu ditutup: klep rujukan ditutup saatos deceleration.Biasana turun ka 0.1.~ 0.2mL / mnt saatos nutup klep rujukan.
Ringkesan:
Dina tulisan ieu, ngan ukur masalah umum dina kromatografi cair anu dianalisis.Tangtosna, dina aplikasi praktis urang, urang bakal mendakan langkung seueur masalah anu sanés.Dina penanganan kasalahan, urang kudu nuturkeun prinsip di handap ieu: ngan ngarobah hiji faktor dina hiji waktu pikeun nangtukeun hubungan antara faktor hypothetical jeung masalah;Sacara umum, nalika ngaganti bagian pikeun ngungkulan, urang kudu nengetan putting bagian gembleng dibongkar deui di tempat pikeun nyegah runtah;Ngabentuk kabiasaan catetan anu saé mangrupikeun konci pikeun kasuksésan penanganan sesar.Dina kacindekan, nalika nganggo HPLC, penting pikeun nengetan sampel pretreatment sareng operasi anu leres sareng pangropéa alat.
waktos pos: Sep-18-2023